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基本信息

質(zhì)粒圖譜和多克隆位點(diǎn)信息

注意： 

客戶在我公司選擇構(gòu)建載體服務(wù)項(xiàng)目時(shí)，請(qǐng)自行提供母源載體。

如要使用本公司保存的母源載體時(shí)，本公司不能保證所有母源載體完全符合客戶預(yù)期，也不承擔(dān)由此產(chǎn)生的任何責(zé)任。

載體描述

pMIR-REPORT miRNA表達(dá)報(bào)告基因載體系統(tǒng)由一個(gè)實(shí)驗(yàn)螢火蟲熒光素酶報(bào)告載體和相關(guān)的β-半乳糖苷酶報(bào)告對(duì)照質(zhì)粒組成。通過(guò)在多克隆位點(diǎn)插入預(yù)測(cè)的miRNA靶序列，pMIR-REPORT熒光素酶報(bào)告miRNA表達(dá)報(bào)告載體可以被用來(lái)進(jìn)行準(zhǔn)確的，定量的，評(píng)估細(xì)胞內(nèi)miRNA的功能。它也可以被用來(lái)檢測(cè)siRNA的靶位點(diǎn)和分析3'端非編碼區(qū)序列對(duì)基因表達(dá)的影響。pMIR-REPORT Luciferase載體包含一個(gè)CMV啟動(dòng)子和終止子控制下的螢火蟲熒光素酶報(bào)告基因。在熒光素酶基因的3'端非編碼區(qū)包含一個(gè)多克隆位點(diǎn)，用于插入的預(yù)測(cè)miRNA的結(jié)合靶序列或其他核苷酸序列。通過(guò)將預(yù)測(cè)的miRNA靶序列克隆插入到pMIR-REPORT載體，熒光素酶報(bào)告表達(dá)就收到調(diào)節(jié)。這模仿的miRNA靶序列的作用方式。
pMIR-REPORT β-gal質(zhì)粒是一個(gè)β-半乳糖苷酶報(bào)告質(zhì)粒，其被設(shè)計(jì)用于細(xì)胞轉(zhuǎn)染操作流程的標(biāo)準(zhǔn)化探索。 該對(duì)照質(zhì)粒表達(dá)的β-半乳糖苷酶，可以用來(lái)標(biāo)準(zhǔn)化由于細(xì)胞活力和轉(zhuǎn)染效率差異導(dǎo)致的細(xì)胞表達(dá)水平的多樣性。
作為附加的功能，pMIR-REPORT Luciferase和pMIR-REPORT β-gal分別含有嘌呤霉素和新霉素抗性基因，這可以用于選擇轉(zhuǎn)染成功的哺乳動(dòng)物細(xì)胞。研究需要的話，抗生素選擇可用于構(gòu)建pMIR-REPORT載體質(zhì)粒穩(wěn)表達(dá)細(xì)胞系。對(duì)于大多數(shù)應(yīng)用，瞬表達(dá)是足夠的，抗生素的篩選也是沒(méi)有必要的。

載體序列TCGCGCGTTTCGGTGATGACGGTGAAAACCTCTGACACATGCAGCTCCCGGAGACGGTCACAGCTTGTCTGTAAGCGGATGCCGGGAGCAGACAAGCCCGTCAGGGCGCGTCAGCGGGTGTTGGCGGGTGTCGGGGCTGGCTTAACTATGCGGCATCAGAGCAGATTGTACTGAGAGTGCACCATATGCGGTGTGAAATACCGCACAGATGCGTAAGGAGAAAATACCGCATCAGGCGCCATTCGCCATTCAGGCTGCGCAACTGTTGGGAAGGGCGATCGGTGCGGGCCTCTTCGCTATTACGCCAGCTGGCGAAAGGGGGATGTGCTGCAAGGCGATTAAGTTGGGTAACGCCAGGGTTTTCCCAGTCACGACGTTGTAAAACGACGGCCAGTGCCAAGCTAGCGGCCGCATACAAAAAACCAACACACAGATCCAATGAAAATAAAAGATCCTTTATTAAGCTTAACTGTTTAAACCTATGATATCACGCACGCGTCTATGCCGGCCTATGAGCTCCCTCACTAGTGCGCAGCTTTCATCACTCGAGCAATTTGGACTTTCCGCCCTTCTTGGCCTTTATGAGGATCTCTCTGATTTTTCTTGCGTCGAGTTTTCCGGTAAGACCTTTCGGTACTTCGTCCACAAACACAACTCCTCCGCGCAACTTTTTCGCGGTTGTTACTTGACTGGCGACGTAATCCACGATCTCTTTTTCCGTCATCGTCTTTCCGTGCTCCAAAACAACAACGGCGGCGGGAAGTTCACCGGCGTCATCGTCGGGAAGACCTGCCACGCCCGCGTCGAAGATGTTGGGGTGTTGTAACAATATCGATTCCAATTCAGCGGGGGCCACCTGATATCCTTTGTATTTAATTAAAGACTTCAAGCGGTCAACTATGAAGAAGTGTTCGTCTTCGTCCCAGTAAGCTATGTCTCCAGAATGTAGCCATCCATCCTTGTCAATCAAGGCGTTGGTCGCTTCCGGATTGTTTACATAACCGGACATAATCATAGGTCCTCTGACACATAATTCGCCTCTCTGATTAACGCCCAGCGTTTTCCCGGTATCCAGATCCACAACCTTCGCTTCAAAAAATGGAACAACTTTACCGACCGCGCCCGGTTTATCATCCCCCTCGGGTGTAATCAGAATAGCTGATGTAGTCTCAGTGAGCCCATATCCTTGTCGTATCCCTGGAAGATGGAAGCGTTTTGCAACCGCTTCCCCGACTTCTTTCGAAAGAGGTGCGCCCCCAGAAGCAATTTCGTGTAAATTAGATAAATCGTATTTGTCAATCAGAGTGCTTTTGGCGAAGAATGAAAATAGGGTTGGTACTAGCAACGCACTTTGAATTTTGTAATCCTGAAGGGATCGTAAAAACAGCTCTTCTTCAAATCTATACATTAAGACGACTCGAAATCCACATATCAAATATCCGAGTGTAGTAAACATTCCAAAACCGTGATGGAATGGGACAACACTTAAAATCGCAGTATCCGGAACGATTTGATTGCCAAAAATAGGATCTCTGGCATGCGAGAATCTGACGCAGGCAGTTCTATGCGGAAGGGCCACACCCTTAGGTAACCCAGTAGATCCAGAGGAATTCATTATCAGTGCAATTGTTTTGTCACGATCAAAGGACTCTGGTACAAAATCGTATTCATTAAAACCGGGAGGTAGATGAGATGTGACGAACGTGTACATCGACTGAAATCCCTGGTAATCCGTTTTAGAATCCATGATAATAATTTTCTGGATTATTGGTAATTTTTTTTGCACGTTCAAAATTTTTTGCAACCCCTTTTTGGAAACAAACACTACGGTAGGCTGCGAAATGTTCATACTGTTGAGCAATTCACGTTCATTATAAATGTCGTTCGCGGGCGCAACTGCAACTCCGATAAATAACGCGCCCAACACCGGCATAAAGAATTGAAGAGAGTTTTCACTGCATACGACGATTCTGTGATTTGTATTCAGCCCATATCGTTTCATAGCTTCTGCCAACCGAACGGACATTTCGAAGTATTCCGCGTACGTGATGTTCACCTCGATATGTGCATCTGTAAAAGCAATTGTTCCAGGAACCAGGGCGTATCTCTTCATAGCCTTATGCAGTTGCTCTCCAGCGGTTCCATCCTCTAGAGGATAGAATGGCGCCGGGCCTTTCTTTATGTTTTTGGCGTCTTCCATGGTGGATCCACGGTTCACTAAACCAGCTCTGCTTATATAGACCTCCCACCGTACACGCCTACCGCCCATTTGCGTCAATGGGGCGGAGTTGTTACGACATTTTGGAAAGTCCCGTTGATTTTGGTGCCAAAACAAACTCCCATTGACGTCAATGGGGTGGAGACTTGGAAATCCCCGTGAGTCAAACCGCTATCCACGCCCATTGATGTACTGCCAAAACCGCATCACCATGGTAATAGCGATGACTAATACGTAGATGTACTGCCAAGTAGGAAAGTCCCATAAGGTCATGTACTGGGCATAATGCCAGGCGGGCCATTTACCGTCATTGACGTCAATAGGGGGCGTACTTGGCATATGATACACTTGATGTACTGCCAAGTGGGCAGTTTACCGTAAATACTCCACCCATTGACGTCAATGGAAAGTCCCTATTGGCGTTACTATGGGAACATACGTCATTATTGACGTCAATGGGCGGGGGTCGTTGGGCGGTCAGCCAGGCGGGCCATTTACCGTAAGTTATGTAACGCGGAACTCCATATATGGGCTATGAACTAATGACCCCGTAATTGATTACTATTAATAACTAAGATCTGGTACCTTGAATTCATGCTTCTCCTCCCTTTAGTGAGGGTAATTCTCTCTCTCTCCCTATAGTGAGTCGTATTAATTCCTTCTCTTCTATAGTGTCACCTAAATCGTTGCAATTCGTAATCATGTCATAGCTGTTTCCTGTGTGAAATTGTTATCCGCTCACAATTCCACACAACATACGAGCCGGAAGCATAAAGTGTAAAGCCTGGGGTGCCTAATGAGTGAGCTAACTCACATTAATTGCGTTGCGCTCACTGCCCGCTTTCCAGTCGGGAAACCTGTCGTGCCAGCTGCATTAATGAATCGGCCAACGCGCGGGGAGAGGCGGTTTGCGTATTGGGCGCTCTTCCGCTTCCTCGCTCACTGACTCGCTGCGCTCGGTCGTTCGGCTGCGGCGAGCGGTATCAGCTCACTCAAAGGCGGTAATACGGTTATCCACAGAATCAGGGGATAACGCAGGAAAGAACATGTGAGCAAAAGGCCAGCAAAAGGCCAGGAACCGTAAAAAGGCCGCGTTGCTGGCGTTTTTCCATAGGCTCCGCCCCCCTGACGAGCATCACAAAAATCGACGCTCAAGTCAGAGGTGGCGAAACCCGACAGGACTATAAAGATACCAGGCGTTTCCCCCTGGAAGCTCCCTCGTGCGCTCTCCTGTTCCGACCCTGCCGCTTACCGGATACCTGTCCGCCTTTCTCCCTTCGGGAAGCGTGGCGCTTTCTCATAGCTCACGCTGTAGGTATCTCAGTTCGGTGTAGGTCGTTCGCTCCAAGCTGGGCTGTGTGCACGAACCCCCCGTTCAGCCCGACCGCTGCGCCTTATCCGGTAACTATCGTCTTGAGTCCAACCCGGTAAGACACGACTTATCGCCACTGGCAGCAGCCACTGGTAACAGGATTAGCAGAGCGAGGTATGTAGGCGGTGCTACAGAGTTCTTGAAGTGGTGGCCTAACTACGGCTACACTAGAAGAACAGTATTTGGTATCTGCGCTCTGCTGAAGCCAGTTACCTTCGGAAAAAGAGTTGGTAGCTCTTGATCCGGCAAAAAAACCACCGCTGGTAGCGGTGGTTTTTTTGTTTGCAAGCAGCAGATTACGCGCAGAAAAAAAGGATCTCAAGAAGATCCTTTGATCTTTTCTACGGGGTCTGACGCTCAGTGGAACGAAAACTCACGTTAAGGGATTTTGGTCATGAGATTATCAAAAAGGATCTTCACCTAGATCCTTTTAAATTAAAAATGAAGTTTTAAATCAATCTAAAGTATATATGAGTAAACTTGGTCTGACAGTTACCAATGCTTAATCAGTGAGGCACCTATCTCAGCGATCTGTCTATTTCGTTCATCCATAGTTGCCTGACTCCCCGTCGTGTAGATAACTACGATACGGGAGGGCTTACCATCTGGCCCCAGTGCTGCAATGATACCGCGAGACCCACGCTCACCGGCTCCAGATTTATCAGCAATAAACCAGCCAGCCGGAAGGGCCGAGCGCAGAAGTGGTCCTGCAACTTTATCCGCCTCCATCCAGTCTATTAATTGTTGCCGGGAAGCTAGAGTAAGTAGTTCGCCAGTTAATAGTTTGCGCAACGTTGTTGCCATTGCTACAGGCATCGTGGTGTCACGCTCGTCGTTTGGTATGGCTTCATTCAGCTCCGGTTCCCAACGATCAAGGCGAGTTACATGATCCCCCATGTTGTGCAAAAAAGCGGTTAGCTCCTTCGGTCCTCCGATCGTTGTCAGAAGTAAGTTGGCCGCAGTGTTATCACTCATGGTTATGGCAGCACTGCATAATTCTCTTACTGTCATGCCATCCGTAAGATGCTTTTCTGTGACTGGTGAGTACTCAACCAAGTCATTCTGAGAATAGTGTATGCGGCGACCGAGTTGCTCTTGCCCGGCGTCAATACGGGATAATACCGCGCCACATAGCAGAACTTTAAAAGTGCTCATCATTGGAAAACGTTCTTCGGGGCGAAAACTCTCAAGGATCTTACCGCTGTTGAGATCCAGTTCGATGTAACCCACTCGTGCACCCAACTGATCTTCAGCATCTTTTACTTTCACCAGCGTTTCTGGGTGAGCAAAAACAGGAAGGCAAAATGCCGCAAAAAAGGGAATAAGGGCGACACGGAAATGTTGAATACTCATACTCTTCCTTTTTCAATATTATTGAAGCATTTATCAGGGTTATTGTCTCATGA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