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基本信息
載體類型: 畢赤酵母蛋白表達(dá)載體 載體抗性: Zeocin (博來(lái)霉素) 載體標(biāo)簽: C-Myc, C-His 篩選標(biāo)記: HIS4/ Zeocin 啟動(dòng)子: GAP 表達(dá)水平: 高拷貝 載體大小: 2884 bp 克隆方法: 多克隆位點(diǎn),限制性內(nèi)切酶 5' 測(cè)序引物: pGAP-F:5′-GTCCCTATTTCAATCAATTGAA-3′ 3' 測(cè)序引物: 3′ AOX1:5′-GCAAATGGCATTCTGACATCC-3′ 載體類型: 畢赤酵母蛋白表達(dá)載體 備注: 如有侵權(quán)請(qǐng)產(chǎn)權(quán)持有人盡快聯(lián)系法務(wù)15927229196
質(zhì)粒圖譜和多克隆位點(diǎn)信息
注意:
客戶在我公司選擇構(gòu)建載體服務(wù)項(xiàng)目時(shí),請(qǐng)自行提供母源載體。
如要使用本公司保存的母源載體時(shí),本公司不能保證所有母源載體完全符合客戶預(yù)期,也不承擔(dān)由此產(chǎn)生的任何責(zé)任。
載體描述
甘油醛-3-磷酸脫氫酶(GAPDH)在許多生物細(xì)胞中包括畢赤酵母中,穩(wěn)定高水平表達(dá)。最近,GAPDH蛋白編碼基因啟動(dòng)子(GAP)被深入研究,并在畢赤酵母中能夠高水表達(dá)重組蛋白,這取決于使用的碳源(Waterham等人, 1997)。GAP啟動(dòng)子(PGAP)的重組蛋白表達(dá)水平略高于AOX1啟動(dòng)子。
pGAPZ A,B,和C載體(2.9 KB)和pGAPZα A,B,和C(3.1 KB)載體使用GAP啟動(dòng)子在畢赤酵母中穩(wěn)定表達(dá)重組蛋白。重組蛋白表達(dá)為帶有C-末端myc抗原表位和C端His標(biāo)簽的融合蛋白。此外,pGAPZα表達(dá)的融合蛋白在N-端帶有釀酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)的α-因子分泌信號(hào)肽。這兩個(gè)系列的載體都提供三個(gè)不同讀碼框的載體,以方便克隆的帶有C-端標(biāo)簽和/或N-末端分泌信號(hào)肽的載體中。
這些載體是基于顯性選擇標(biāo)記,Zeocin(博萊霉素)的篩選標(biāo)記可以同時(shí)使用于畢赤酵母和大腸桿菌。
載體序列
ORIGIN
1 agatcttttt tgtagaaatg tcttggtgtc ctcgtccaat caggtagcca tctctgaaat
61 atctggctcc gttgcaactc cgaacgacct gctggcaacg taaaattctc cggggtaaaa
121 cttaaatgtg gagtaatgga accagaaacg tctcttccct tctctctcct tccaccgccc
181 gttaccgtcc ctaggaaatt ttactctgct ggagagcttc ttctacggcc cccttgcagc
241 aatgctcttc ccagcattac gttgcgggta aaacggaggt cgtgtacccg acctagcagc
301 ccagggatgg aaaagtcccg gccgtcgctg gcaataatag cgggcggacg catgtcatga
361 gattattgga aaccaccaga atcgaatata aaaggcgaac acctttccca attttggttt
421 ctcctgaccc aaagacttta aatttaattt atttgtccct atttcaatca attgaacaac
481 tatttcgaaa cgaggaattc acgtggccca gccggccgtc tcggatcggt acctcgagcc
541 gcggcggccg ccagcttggg cccgaacaaa aactcatctc agaagaggat ctgaatagcg
601 ccgtcgacca tcatcatcat catcattgag ttttagcctt agacatgact gttcctcagt
661 tcaagttggg cacttacgag aagaccggtc ttgctagatt ctaatcaaga ggatgtcaga
721 atgccatttg cctgagagat gcaggcttca tttttgatac ttttttattt gtaacctata
781 tagtatagga ttttttttgt cattttgttt cttctcgtac gagcttgctc ctgatcagcc
841 tatctcgcag ctgatgaata tcttgtggta ggggtttggg aaaatcattc gagtttgatg
901 tttttcttgg tatttcccac tcctcttcag agtacagaag attaagtgag accttcgttt
961 gtgcggatcc cccacacacc atagcttcaa aatgtttcta ctcctttttt actcttccag
1021 attttctcgg actccgcgca tcgccgtacc acttcaaaac acccaagcac agcatactaa
1081 attttccctc tttcttcctc tagggtgtcg ttaattaccc gtactaaagg tttggaaaag
1141 aaaaaagaga ccgcctcgtt tctttttctt cgtcgaaaaa ggcaataaaa atttttatca
1201 cgtttctttt tcttgaaatt ttttttttta gtttttttct ctttcagtga cctccattga
1261 tatttaagtt aataaacggt cttcaatttc tcaagtttca gtttcatttt tcttgttcta
1321 ttacaacttt ttttacttct tgttcattag aaagaaagca tagcaatcta atctaagggc
1381 ggtgttgaca attaatcatc ggcatagtat atcggcatag tataatacga caaggtgagg
1441 aactaaacca tggccaagtt gaccagtgcc gttccggtgc tcaccgcgcg cgacgtcgcc
1501 ggagcggtcg agttctggac cgaccggctc gggttctccc gggacttcgt ggaggacgac
1561 ttcgccggtg tggtccggga cgacgtgacc ctgttcatca gcgcggtcca ggaccaggtg
1621 gtgccggaca acaccctggc ctgggtgtgg gtgcgcggcc tggacgagct gtacgccgag
1681 tggtcggagg tcgtgtccac gaacttccgg gacgcctccg ggccggccat gaccgagatc
1741 ggcgagcagc cgtgggggcg ggagttcgcc ctgcgcgacc cggccggcaa ctgcgtgcac
1801 ttcgtggccg aggagcagga ctgacacgtc cgacggcggc ccacgggtcc caggcctcgg
1861 agatccgtcc cccttttcct ttgtcgatat catgtaatta gttatgtcac gcttacattc
1921 acgccctccc cccacatccg ctctaaccga aaaggaagga gttagacaac ctgaagtcta
1981 ggtccctatt tattttttta tagttatgtt agtattaaga acgttattta tatttcaaat
2041 ttttcttttt tttctgtaca gacgcgtgta cgcatgtaac attatactga aaaccttgct
2101 tgagaaggtt ttgggacgct cgaaggcttt aatttgcaag ctggagacca acatgtgagc
2161 aaaaggccag caaaaggcca ggaaccgtaa aaaggccgcg ttgctggcgt ttttccatag
2221 gctccgcccc cctgacgagc atcacaaaaa tcgacgctca agtcagaggt ggcgaaaccc
2281 gacaggacta taaagatacc aggcgtttcc ccctggaagc tccctcgtgc gctctcctgt
2341 tccgaccctg ccgcttaccg gatacctgtc cgcctttctc ccttcgggaa gcgtggcgct
2401 ttctcaatgc tcacgctgta ggtatctcag ttcggtgtag gtcgttcgct ccaagctggg
2461 ctgtgtgcac gaaccccccg ttcagcccga ccgctgcgcc ttatccggta actatcgtct
2521 tgagtccaac ccggtaagac acgacttatc gccactggca gcagccactg gtaacaggat
2581 tagcagagcg aggtatgtag gcggtgctac agagttcttg aagtggtggc ctaactacgg
2641 ctacactaga aggacagtat ttggtatctg cgctctgctg aagccagtta ccttcggaaa
2701 aagagttggt agctcttgat ccggcaaaca aaccaccgct ggtagcggtg gtttttttgt
2761 ttgcaagcag cagattacgc gcagaaaaaa aggatctcaa gaagatcctt tgatcttttc
2821 tacggggtct gacgctcagt ggaacgaaaa ctcacgttaa gggattttgg tcatgcatga
2881 gatc
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